Cómo indica la OMS en sus últimos
estudios, desde hace unas décadas hasta la actualidad la calidad seminal ha
descendido de manera drástica, produciendo un aumento en la aparición de
problemas reproductivos. Debido a esto, los análisis seminales han tomado una
gran importancia en el ámbito de la medicina reproductiva.
También toma importancia debido a la necesidad por parte
de los investigadores de una prueba laboratorial que les permitiera predecir de
forma precisa la capacidad fecundante de una muestra seminal que posteriormente
será usada en una inseminación. Buscando este método adecuado, sería
interesante que el método pudiera
analizar las muestras rápidamente y que eliminara la subjetividad inherente a
la técnica, ya que la evaluación microscópica de la calidad del semen depende
de la persona que la realice, así como de muchas características funcionales y
morfológicas de los espermatozoides, por todo esto se plantea el desarrollo de
un método automatizado y objetivo.
De esta forma aparece el Computer
Assisted Semen Análisis (CASA) desarrollado en la Universidad de Pennsylvania
por Liu y Warne en 1977 y perfeccionado por Amann y Hammersatedt en 1980.
El sistema CASA se introduce en
el mercado a principio de los 80, originalmente para la evaluación de semen
humano. Con el paso de los años se ha ido perfeccionando y modernizándose, y
gracias a que su precio fue descendiendo, ha ido implantándose en más ámbitos
aparte de la reproducción humana. En la actualidad se utiliza también en
veterinaria, tanto en el ámbito de la investigación, como en el de la industria
de los centros de inseminación artificial.
Un sistema CASA consta de varias
unidades independientes:
Un microscopio de constraste de
fases conectado a una cámara de video, que envía la imagen desde el microscopio
a un monitor de TV. La imagen se envía al ordenador, donde un analizador
digital de imagen captura varias fotografías seridas de cada campo. El software
discrimina a los espermatozoides de otras partículas que puedan aparecer en la
imagen por su tamaño, y analiza la trayectoria recorrida por cada
espermatozoide individual, la velocidad de las células, el movimiento
rectilíneo, circular o lateral.
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La velocidad es uno de los parámetros que puede
medir el CASA. Esta se realiza de tres maneras diferentes:
- VAP : es la distancia recorrida por el espermatozoide a lo largo de la trayectoria media.
- VSL : velocidad según la trayectoria rectilínea. Distancia recorrida entre el primer punto y el último de su trayectoria.
- VCL: velocidad según la trayectoria curvilínea. Distancia recorrida a lo largo de su trayectoria real en función del tiempo.
De todos ellos
el VAP (Promedio de velocidad de paso) es el más utilizado en los análisis
seminales.
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El movimiento de cabeceo o desvío de su
trayectoria se cuantifica a través de dos parámetros como son:
- ALH: Amplitud del desplazamiento lateral de la cabeza del espermatozoide
- BCF: Frecuencia de corte de la línea de trayectoria.
- La dirección de la trayectoria espermática se
mide a través de tres cocientes como son la Linealidad (LIN),
la Rectilineidad
(STR) y el índice de oscilación (WOB).
La
linealidad es el cociente entre el VSL/VCL ,
la rectilineidad es el cociente
entre VSL/VAP y el índice de oscilación es la relación porcentual entre la VAP /VCL.
Estas
características del movimiento espermático nos permite saber como es la
dirección del movimiento y ha sido correlacionada como un factor que incrementa
la tasa de fertilidad.
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El número de espermatozoides totales y motiles
se puede calcular por medio de los valores:
- MOT: El cual indica el porcentaje de espermatozoides motiles
- PRG: Indica el porcentaje de espermatozoides motiles progresivos. Este dato es el que se utiliza al evaluar las dosis inseminante.
El sistema CASA nos permite
identificar subpoblaciones de
espermatozoides que presentan distintos patrones de movilidad que persisten en
una misma muestra, se ha demostrado que las diferentes subpoblaciones responden
de manera diferente ante procesos de criopreservación o la exposición de
agentes capacitantes.
Los espermatozoides que forman
parte de un eyaculado no son uniformes en cuanto sus características de
motilidad, en el mismo eyaculado podemos encontrar espermatozoides que se mueven de forma rápida
y progresiva y otros que se mueven de forma más lenta, y por último otros que
apenas se mueven. Es interesante conocer estas diferencias, porque probablemente la capacidad fecundante
de una muestra de semen sea mejor
si la muestra está formado solamente por
los espermatozoides más competentes.
Pero el uso de sistemas CASA
presenta algunos inconvenientes que es necesario conocer:
- No existe una estandarización y optimización de los equipos y de los procedimientos utilizados en los análisis
- Cada laboratorio utiliza un equipo diferente, con diferentes características técnicas que dan lugar a resultados muy dispares entre centros.
- A los resultados les afectan diferentes factores como la temperatura de la muestra, volumen, tipo de cámara, concentración de la muestra,… Por ello, es necesario que cada equipo estandarice un protocolo, sabiendo que los resultados serán únicamente aplicables a muestras evaluadas con el equipo en cuestión
- Se puede tender a una sobreestimación de la
concentración espermática, debido a que el aparato puede contabilizar el mismo
espermatozoide dos veces por las colisiones espermáticas. Esta sobrestimación
se produce en mayor medida cuanto menos diluida este la muestra, ya que
disminuyen las colisiones.
Os dejamos un corto, pero práctico tutorial de como utilizar el sistema CASA.
Bibliografía:
- Automated semen analysis. Stephen P. Boyers, M.D; Russell 0. Davis, Ph.D. ; David F. Katz, Ph.D.
- Mortimer ST. CASA–practical aspects. J Androl 2000 Ago;21(4):515–524
- www.serida.org
- www.inia.es
Fernando Cuadrado, Mónica Cubero y Cristina Goméz
Máster de Biología y Tecnología de la Reproducción
