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7 de enero de 2016

¿Cómo conseguir espermatozoides en un hombre azoospérmico?


Un hombre azoospérmico es aquel que no presenta espermatozoides en su eyaculado.

Puede ser debido a una azoospermia obstructiva (en la que hay obstrucción de los conductos del tracto reproductivo masculino), o por una azoospermia no obstructiva (en la que subyace factor hormonal y anormalidades celulares).

La recuperación espermática en estos hombres tradicionalmente se realizaba por biopsia testicular, que ofrece la mayor oportunidad de recuperar espermatozoides, pero debido al tamaño de la herida y el consiguiente tiempo de curación, en comparación con otras técnicas, se suelen utilizar más otros métodos:

                                                                                                                               
  • MESA: Aspiración Espermática Epididimaria Micro-quirúrgica.
  • PESA: Aspiración Espermática Epididimaria Percutánea.
  • TESE: Extracción Espermática Testicular (sería la biopsia abierta).
  • TESA: Aspiración Espermática Testicular (percutánea).
  • TEFNA: Aspiración Testicular Epididimaria con Aguja Fina (también percutánea).
A continuación, se dejan las fotos esquemáticas de las técnicas y lo más representativo de cada una de ellas:




Figura 1 A) PESA. El epidídimo se estabiliza entre el dedo índice y el dedo pulgar. Una aguja unida a una jeringa de tuberculina se inserta en el epidídimo a través de la piel del escroto (A1), y el líquido se aspira. B) MESA. Después de la exposición del epidídimo, se abre y se microdissecciona un túbulo epididimario dilatado. El fluido que emana del túbulo epididimario se aspira utilizando un angiocatéter unido a una jeringa de tuberculina (B1). C) Manipulación en el laboratorio del esperma. Los aspirados se vacían en un tubo que contiene medio de esperma tamponado y se envían para su examen al microscopio (C1). Las alícuotas aspiradas se extienden sobre una placa de Petri y se examinan microscópicamente para confirmar la presencia de espermatozoides móviles (C2).

MESA

En esta técnica es necesario administrar anestesia general. Típicamente, se recuperan sólo unos pocos microlitros de fluido porque las muestras de espermatozoides del epidídimo están altamente concentradas. Los espermatozoides epididimarios obtenidos por este método, sólo son útiles para una técnica avanzada de reproducción consistente en la inyección literal de un espermatozoide en un óvulo, cuando existen problemas para que esto se consiga de forma natural. Como se suele obtener una muestra generosa, se puede criopreservar en diferentes fracciones para futuros intentos de esta técnica avanzada de reproducción.


PESA

A diferencia de MESA, PESA es un procedimiento que se realiza a ciegas, además de que en ella se emplea anestesia local.


Tanto MESA como PESA están especialmente indicadas para la azoospermia obstructiva.


En un estudio en el que comparaban las 2 técnicas de recuperación de espermatozoides del epidídimo (PESA y MESA), la recuperación por PESA resultó ser de 61 espermatozoides sobre 100 posibles, mientras que por MESA resultó ser de 93 espermatozoides sobre 100 posibles, por lo que se concluyó con que con la técnica MESA el éxito era mayor (3).







Figura 2 A) TESA. Una aguja unida a una jeringa se inserta de forma percutánea en el testículo. Se crea presión negativa y la punta de la aguja se mueve dentro del testículo para interrumpir los túbulos seminíferos y áreas diferentes de la muestra (A1). Una parte de tejido testicular se aspira, y se utiliza un forceps para eliminar los túbulos seminíferos que exteriorizan de la piel escrotal (A2). B) TESE. Se realiza una incisión en la piel de 1-2 cm para permitir la apertura de las capas escrotales a la túnica. El testículo no se exterioriza del escroto. Se hace una pequeña incisión en una zona avascular de la túnica para exponer parénquima testicular. Un fragmento de aproximadamente 5x5 mm se extirpa. Los fragmentos adicionales pueden ser tomados de la misma incisión o de diferentes polos testiculares utilizando múltiples incisiones. C) Manipulación del esperma en el laboratorio. Las muestras testiculares se vacían en un tubo que contiene medio de espermatozoides (C1), y el tubo se transfiere al laboratorio para el procesamiento de tejidos. Los fragmentos testiculares se lavan para que estén libres de coágulos de sangre, y los túbulos seminíferos se dispersan mecánicamente usando jeringas con agujas de tuberculina hasta que no se ven túbulos intactos (C2). Los homogeneizados testiculares se examinan microscópicamente para confirmar la presencia de espermatozoides móviles (C3).


TESA   

Sería para los pacientes con azoospermia obstructiva en los que los espermatozoides no se pueden encontrar en el epidídimo, por lo que se intentarían encontrar en el testículo.

En la TESA también se utiliza anestesia local.


Belker y Schrepferman encontraron espermatozoides procedentes del testículo viables en 75 de cada 100 pacientes con azoospermia obstructiva tratados con TESA.


TESE

Sería para pacientes con azoospermia no obstructiva que desean tener un hijo que herede su material genético.

TESE requiere el uso de anestesia general.

En general, el número de espermatozoides obtenidos por biopsia abierta (TESE) es significativamente mayor que el obtenido por aspiración con aguja.

De un estudio se obtiene que la TESE sería la segunda opción en el caso de azoospermia no obstructiva, en orden de probabilidad de encontrar espermatozoides.

Schlegel y colaboradores, comunicaron que consiguieron espermatozoides en 95 de cada 100 hombres con azoospermia no obstructiva, y en 75 de cada 100 hombres con azoospermia obstructiva mediante TESE.


Pero también, Schlegel encontró que la microdisección (micro-TESE) mejoraba el número de espermatozoides conseguidos de 10 sobre 22 posibles a 17 sobre 27 posibles, o lo que es lo mismo, de 45 espermatozoides sobre 100 posibles a 63 espermatozoides sobre 100 posibles, en varias TESE seguidas.  




Figura 3 A) micro-TESE. En estos procedimientos se utilizan el microscopio quirúrgico y la técnica microquirúrgica. Después de la exteriorización del testículo, se realiza una sola y gran incisión en una zona avascular de la túnica para exponer el parénquima testicular (A). La microdisección de los túbulos seminíferos se lleva a cabo para identificar y eliminar túbulos que tienen más probabilidades de contener células germinales y la espermatogénesis activa. Una fotografía tomada en x40-magnificación indica túbulos seminíferos ampliados y no ampliados (B). Los túbulos agrandados pueden contener espermatogénesis activa, como se ilustra en la sección transversal de una espécimen histopatología (B1). Los túbulos no agrandados son más propensos a no contener la espermatogénesis activa (B2). Las muestras testiculares extirpadas se envían al laboratorio para su procesamiento y análisis. Manipulación del esperma en el laboratorio. Los túbulos seminíferos se dispersan mecánicamente usando jeringas con agujas de tuberculina (C1). Los homogeneizados testiculares se examinan microscópicamente para confirmar la presencia de espermatozoides móviles (C2).

Micro-TESE

Con micro-TESE se obtiene un número abundante de espermatozoides a partir de una mínima cantidad de tejido testicular en hombres con azoospermia no obstructiva. Es decir, se obtiene una mayor cantidad de espermatozoides con menos tejido removido, comparando con TESE.

Las ventajas de la micro-TESE, además de las tasas de recuperación de espermatozoides superiores, incluyen la prevención de complicaciones como hematomas, fibrosis, y la producción de andrógenos alterada. 

De un estudio se obtiene que la micro-TESE sería la primera elección en el caso de azoospermia no obstructiva, en orden de probabilidad de encontrar espermatozoides.



Figura 4. TEFNA. Una aguja de calibre fino 23 acoplada a una jeringa de 10 ml se inserta percutáneamente en el testículo para marcar diferentes áreas. Se aplica una presión negativa y la aguja se mueve dentro y fuera del testículo sin cambiar la dirección ni sacar la aguja. Un fragmento de tejido de cada área marcada es vertido en un tubo previamente identificado que contiene medio de cultivo de esperma.

TEFNA

Este procedimiento puede utilizarse tanto en la azoospermia obstructiva como en la azoospermia no obstructiva. Se combina la aspiración epididimaria con la aspiración testicular, empleando una aguja fina.

En esta técnica se emplea anestesia local.

Aunque para algunos sería la primera opción en una azoospermia no obstructiva, según un estudio TEFNA sería la tercera opción, en orden de probabilidad de encontrar espermatozoides.


Según un estudio realizado por Bhushan y colaboradores, múltiples aspiraciones con aguja fina testiculares (TEFNA) se han intentado en los hombres con azoospermia no obstructiva con éxito variable. El éxito en el número de espermatozoides conseguidos por TEFNA, según este estudio, depende de la causa y la gravedad de la azoospermia. En un estudio realizado desde un punto en el tiempo en adelante, que comparaba la eficacia de múltiples biopsias con aguja con la extirpación testicular abierta, los espermatozoides se recuperaron en sólo 14 de los 100 pacientes con azoospermia no obstructiva de múltiples aspiraciones de aguja, y en 63 de cada 100 pacientes después de la biopsia abierta. De este estudio se obtuvo que el orden de encontrar espermatozoides de mayor a menor probabilidad en azoospermia no obstructiva es: Micro-TESE, TESE, TEFNA, TESA.



CONCLUSIONES

Las ventajas de las técnicas de recuperación espermática percutáneas (PESA, TESA, TEFNA) es que pueden ser desarrolladas con anestesia local, lo que reduce las molestias, y al mismo tiempo, costes. La ventaja de MESA es que la cantidad de espermatozoides que puede ser obtenida es mayor, esto permite la criopreservación de muestras extras para posibles futuros ciclos de la técnica avanzada de reproducción consistente en la introducción literal de un espermatozoide en un óvulo.

Las posibilidades de recuperación de espermatozoides, y de lograr un nacimiento vivo por esta técnica avanzada de reproducción, se incrementan en parejas cuyo hombre presenta azoospermia obstructiva, en lugar de azoospermia no obstructiva. 

                                             Imagen obtenida de Wikipedia.

Según el tipo de azoospermia, se puede recurrir a una técnica u otra:

En la azoospermia obstructiva, a su vez, según el tramo afectado, se puede optar por una técnica u otra. Se puede, por ejemplo, realizar la recuperación por PESA, pero si no es posible obtener espermatozoides del epidídimo, se podrían obtener del testículo con TESA.

En la azoospermia no obstructiva, podría emplearse para la recuperación de espermatozoides, la micro-TESE, por ejemplo.


                                             Imagen obtenida de Wikipedia.



FUENTE DE LA FOTOGRAFÍA DE TEFNA:


Disponible a: 05/01/2016 A las 17:28 horas.

El resto de fotografías están tomadas de este artículo:

Sandro C. Esteves Ricardo Miyaoka. Ashok. Sperm retrieval techniques for assisted reproduction. ANDROFERT, Andrology and Human Reproduction Clinic (SCE, RM), Campinas, São Paulo, Brazil and Center for Reproductive Medicine, Glickman Urological and Kidney Institute (AA), Cleveland Clinic, Cleveland, Ohio, USA. Vol. 37 (5): 570-583, September - October, 2011.

A excepción de las imágenes de Wikipedia, donde debajo ha quedado escrita la procedencia.

Bibliografía:

1. Urbina. Lerner Biber. Fertilidad y reproducción asistida. Primera edición. Caracas: Editorial Médica Panamericana; 2008.

2. Wana Popal. Zsolt P Nagy. Laboratory processing and intracytoplasmic sperm injection using epididymal and testicular spermatozoa: what can be done to improve outcomes? Clinics (Sao Paulo). 2013 Feb; 68(Suppl 1): 125–130. Doi: 10.6061/clinics/2013(Sup01)14. 

3. Bhushan K.Grangade. Cryopreservation of testicular and epididymal sperm: techniques and clinical outcomes of assisted conception. Clinics (Sao Paulo). 2013 Feb; 68(Suppl 1): 131–140. Doi: 10.6061/clinics/2013(Sup01)15.

4. Sandro C. Esteves Ricardo Miyaoka. Ashok. Sperm retrieval techniques for assisted reproduction. ANDROFERT, Andrology and Human Reproduction Clinic (SCE, RM), Campinas, São Paulo, Brazil and Center for Reproductive Medicine, Glickman Urological and Kidney Institute (AA), Cleveland Clinic, Cleveland, Ohio, USA. Vol. 37 (5): 570-583, September - October, 2011.

5. Aby Lewin. Benjamin Reubinoff. Anat Porat-Katz. David Weiss. Vered Eisenberg. Revital Arbel. Hagar Barel. Anat Safran. Testicular fine needle aspiration: the alternative method for sperm retrieval in non-obstructive azoospermia. Hum. Reprod. (1999) 14 (7):1785-1790. Doi: 10.1093/humrep/14.7.1785.

6. Belker AM. Schrepferman CG. Vasovasostomy, vasoepididymostomy and Sperm retrieval techniques. American Urological Association 99th Annual Meeting. San Francisco: American Urological Association. 2004.

7. Ron.El R. Strassburguer D. Fredler S. Komarovski D. Bern O. Soffer Y. Raziel A. Extendend Sperm preparation: an alternative to testicular sperm extraction in non-obstructive azoospermia. Hum. Reprod. 1997; 12:1 222-6.

8. Schlegel PN. Palermo GD. Goldstein M. Menéndez S. Zaninovic N. Veeck LL. Rosenwaks Z. Testicular sperm extraction with ICSI for non-obstructive azoospermia. Urology 1997; 49: 435-40.

9. Schlegel PN. Testicular sperm extraction: microdissection improves sperm yield with minimal tissue excision. Hum. Reprod. 1999; 14: 131-5.

10. Schlegel PN. Sue LM. Physiological consecuences of testicular sperm extraction. Hum. Reprod. 1997; 12:1 688-92.

11. Ture PJ. Ljung BM. Cha I. Conaghan J. Diagnostic findings from testis fine needle aspiration mapping in obstructed and non-obstructed azoospermic men. J Urol 2000; 163:1 709-16.

12. Shrivastav P. NadKarni P. Wensroort S. Craft I. Percutaneous azoospermia. Hum. Reprod. 1994; 11:2  058-61.

13. Craft I. Tsirigotis M. Simplified recovery, preparation and cryopreservation of testicular spermatozoa. Human. Reprod. 1995; 10:1 623-7.

14. Craft I. Tsirigotis M. Bennet V. Mohamed T. Yasser K. Hogewind G. et al. Percutaneous epididymal sperm aspiration and intracitoplasmatic sperm injection in the management of infertility due to obstructive azoospermia. Fertil Steril. 1995; 63:1 038-42.

15. Safran A. Reubinoff BE. Porat-Katz A. Schenker IG. Lewin A. Assisted reproduction for the treatment of azoospermia. Hum. Reprod. 1998; 13 (Supl 4): 47-60.



Autora:

         María Jesús Nieto García.

Análisis Funcional del Espermatozoide.

Máster Universitario en Biología y Tecnología de la Reproducción, 2015-2016, Universidad de Oviedo.

Recuperación espermática en hombres con azoospermia

INTRODUCCIÓN


La azoospermia es definida como la ausencia de espermatozoides en el fluido seminal, que puede ser debida a una inadecuada estimulación hormonal (hipogonadismo hipogonadotrópico), anormalidades espermáticas u obstrucción. Aproximadamente el 10-15% de la infertilidad por factor masculino se ha atribuido a azoospermia.

Una vez obtenido el diagnóstico de azoospermia mediante la realización de entre 2 y 3 seminogramas, su evaluación debe dirigirse a determinar si es causada por una pérdida de espermatogénesis o por una obstrucción ductal. Las causas incluyen: obstrucción de los vasos deferentes, tamaño testicular, FSH sérica (Figura 1).





Figura 1. Algoritmo para la evaluación del paciente con azoospermia, (tomada de Urbina. Lerner Biber. Fertilidad y reproducción asistida. Primera edición. Caracas: Editorial Médica Panamericana; 2008).


Causas de azoospermia obstructiva: orquidopexia, cirugía inguinal, escrotal o retroperitoneal, vasectomía, enfermedades de transmisión sexual, tuberculosis y procesos infecciosos, entre otras. También es interesante investigar en la familia si hay antecedentes de fibrosis quística, factor muy importante en la obstrucción.

La azoospermia no obstructiva es el resultado de la producción de esperma gravemente deteriorado o inexistente: hipogonadismo hipogonadotrópico, anormalidades espermáticas.


Objetivos de la recuperación espermática:

  • Obtener la mejor calidad de espermatozoides posible.
  • Recuperar un adecuado número de espermatozoides tanto para uso inmediato como para criopreservación.
  • Minimizar el daño al tracto reproductivo de modo que no amenace futuros intentos de recuperación espermática o reconstrucción quirúrgica.

Requerimientos:

El personal del laboratorio de reproducción asistida debe tener experiencia en ICSI y debe estar presente en el lugar de la recuperación espermática.

Para realizar métodos de recuperación espermática abierta se debe contar con instrumental microquirúrgico; mientras que para la recuperación espermática percutánea, debe contarse con dispositivos de presión negativa que puedan acoplarse a agujas finas, así como también disponer de instrumental (pistolas) de biopsia percutánea

Se debe tener disponible un medio de incubación o cultivo con nutrientes espermáticos como HAM’S F-10.

Por normas internacionales para la criopreservación espermática se solicitarán previamente exámenes para descartar Hepatitis B, Hepatitis C, VIH, HTLV 1 y 2, Sífilis, CMV (Citomegalovirus), Neisseria gonorrhoeae y Chlamydia trachomatis.

Debe tenerse un microscopio de laboratorio en el sitio donde se realice la recuperación espermática para determinar el número y la movilidad de los espermatozoides del esperma obtenido. De igual modo, las técnicas de recuperación espermática abierta requieren de la disponibilidad de un microscopio quirúrgico.

Métodos:

Tradicionalmente se realizaba por biopsia testicular. Este método convencional de extracción de esperma por vía quirúrgica general, biopsia convencional, ofrece la mejor oportunidad de recuperar espermatozoides, independientemente de la etiología de la azoospermia. La biopsia abierta también permite la escisión de una masa de tejido más grande, permitiendo el acceso a un mayor número de espermatozoides disponibles para la congelación. El principal inconveniente de la biopsia abierta, desde el punto de vista del paciente, es el tamaño de la herida y el tiempo de curación en comparación con otras formas de aspiración, a saber, la aspiración con aguja. Por eso, ahora, se suelen utilizar más otros métodos:


  • MESA: Aspiración Espermática Epididimaria Micro-quirúrgica.
  • PESA: Aspiración Espermática Epididimaria Percutánea.
  • TESE: Extracción Espermática Testicular (sería la biopsia abierta).
  • TESA: Aspiración Espermática Testicular (percutánea).
  • TEFNA: Aspiración Testicular Epididimaria con Aguja Fina (también percutánea).


MESA

(Urbina. Lerner Biber. Fertilidad y reproducción asistida. Primera edición. Caracas: Editorial Médica Panamericana; 2008). Esta técnica implica la exposición de los túbulos epididimarios, la apertura microquirúrgica del túbulo y la aspiración del fluido tubular dentro de una jeringa de 1 cm3 que contiene medio de incubación espermática.

Para esta aspiración puede usarse un catéter (angiocatéter) de pequeña talla (22-27 gauge) unido a una jeringa para desarrollar la aspiración. Es útil deprimir el área abierta del túbulo epididimario para crear una apertura a partir de la cual el fluido epididimario pueda ser aspirado. Es necesario administrar al sujeto anestesia general. Si hay espermatozoides móviles que se encuentren en el primer sitio, la maniobra se repite, hasta recuperar repetidas muestras. Típicamente, se recuperan sólo unos pocos microlitros de fluido porque las muestras de espermatozoides del epidídimo están altamente concentradas en el fluido del epidídimo (aproximadamente 1 × 10 6 espermatozoides / mL).

Los espermatozoides epididimarios obtenidos por este método sólo son útiles para ICSI.

Los biólogos o demás personal cualificado, pueden congelar los espermatozoides en varios tubos o pajuelas, para poder ser utilizados en varios intentos de ICSI, y así disminuir la necesidad de realizar otra MESA, ya que se suelen obtener una gran cantidad de espermatozoides.

Es la técnica de elección para algunos cirujanos para recuperar quirúrgicamente espermatozoides debido a la alta concentración y la calidad de los espermatozoides obtenidos en comparación con la obtención de espermatozoides testiculares, especialmente en pacientes con obstrucción del epidídimo irreparable. Los espermatozoides del epidídimo son maduros y progresivamente móviles, y aspirados del epidídimo son mucho más limpios y desprovistos de los restos celulares que se ven en las preparaciones de espermatozoides testiculares. La motilidad de los espermatozoides del epidídimo hace que la selección de espermatozoides durante la ICSI sea más fácil sin la introducción de medidas adicionales (como el tratamiento con agentes que mejoran la motilidad), a diferencia de que estas medidas adicionales pueden ser necesarias para identificar gametos viables si se utilizan espermatozoides testiculares. En un estudio comparativo de las dos técnicas de recuperación de espermatozoides del epidídimo (PESA y MESA), la tasa de recuperación de espermatozoides por PESA resultó ser del 61%, mientras que por MESA resultó ser del 93%, por lo que se concluyó con que con la técnica MESA el éxito era mayor.

Aunque, por otros estudios, se ve que es posible que al realizar MESA puedan encontrarse espermatozoides con una movilidad disminuida o ausente, por lo que puede ser necesaria la obtención de fluido tubular epididimario de niveles más altos, o incluso, de conductos deferentes para así obtener espermatozoides móviles del epidídimo obstruido. La disección es, entonces, realizada en el extremo caudal del epidídimo y llevada, proximalmente, hasta que se localicen espermatozoides móviles. Los biólogos deben informar al cirujano cuando haya sido obtenido un número suficiente de espermatozoides.

Si hay disparidad en el tamaño de los testículos, el procedimiento se desarrolla en el testículo más grande; aunque, en ocasiones, es necesario realizarlo bilateralmente y así obtener espermatozoides para criopreservación en suficientes alícuotas para futura ICSI (idealmente cada alícuota debe contener de 250.000 a 500.000 espermatozoides móviles).

Al finalizar el procedimiento, algunos cirujanos cierran cada incisión en el túbulo epididimario; mientras que otros, simplemente, cauterizan cada incisión para sellar la abertura.


PESA

(Urbina. Lerner Biber. Fertilidad y reproducción asistida. Primera edición. Caracas: Editorial Médica Panamericana; 2008). Esta técnica se lleva a cabo mediante una aguja tipo mariposa de 21 a 22 gauge, la cual puede unirse a una jeringa de tuberculina de 1 cm3 o acoplarse a una de mayor capacidad (25 cm3) montada en un dispositivo que permite crear presión negativa de manera sostenida.

A diferencia de MESA, donde el cirujano es capaz de visualizar los túbulos expuestos del epidídimo, PESA es un procedimiento ciego. De nuevo, si hay espermatozoides móviles presentes en el primer sitio, el cirujano extraerá repetidamente muestras.

La aguja es insertada en el epidídimo y se aspira hasta ver la aparición de una columna o gotas de fluido epididimario, entonces se sujeta el tubo con el fluido extraído y la jeringa antes de remover la aguja. Este procedimiento con técnicas de reproducción asistida obtiene tasas de embarazo equivalentes a aquéllas obtenidas usando recuperación espermática de manera micro-quirúrgica o por eyaculación. Es importante tener presente que puede producirse un daño irreversible del epidídimo, lo que impediría una futura reconstrucción si ésta fuese deseada. En esta técnica se emplea anestesia local.

PESA puede ser una buena opción para los pacientes con obstrucción ductal distal al epidídimo.


TESA

(Urbina. Lerner Biber. Fertilidad y reproducción asistida. Primera edición. Caracas: Editorial Médica Panamericana; 2008). Para los pacientes con azoospermia obstructiva en los que los espermatozoides no se pueden encontrar en el epidídimo, siempre es posible encontrar espermatozoides en el testículo.

Puede ser llevada a cabo con los materiales de la PESA. También se utiliza anestesia local. Una vez introducida la aguja en el testículo y creada la presión negativa, se mueve la aguja hacia dentro y hacia fuera, sin ser extraída y en la misma dirección, múltiples veces. Antes de remover la aguja, la presión negativa es eliminada lentamente para prevenir el aspirado de túbulos. Después de ser retirada, se separa de la jeringa, se aspira aire en ésta (de 5 a 10 cm3) y se conecta nuevamente, usando el aire para pasar el contenido de la aguja dentro del medio de incubación espermática.

Un método alternativo a este es llevar a cabo la TESA mediante una aguja de 18 o 20 gauge de biopsia, montada en una pistola para tal fin, de las cuales existen varias en el mercado. Una vez finalizado el procedimiento, debe realizarse presión sobre el sitio de punción durante 1 ó 2 minutos para garantizar la hemostasia.

Belker y Schrepferman han encontrado espermatozoides testiculares viables en un 75% de pacientes con azoospermia obstructiva tratados con TESA, por eso sus tasas de embarazo resultaron relativamente altas. En sus primeros 103 casos de TESA con ICSI lograron una tasa de embarazos clínicos del 30% y una de embarazos a término del 25%. Más recientemente, muchos centros de fertilidad han reportado tasas de embarazos clínicos del 40% al 55%, equivalentes a las logradas con esperma eyaculado normalmente.


TESE

(Urbina. Lerner Biber. Fertilidad y reproducción asistida. Primera edición. Caracas: Editorial Médica Panamericana; 2008). Es una opción disponible para hombres con azoospermia no obstructiva que desean tener un hijo genético, consiste en la recuperación espermática del tejido testicular por alguna forma de biopsia mediante cirugía abierta. Esta técnica requiere anestesia general.

Puede realizarse por medio de microdisección o mediante la obtención de tejido testicular; al practicar una escisión de éste con unas tijeras, una vez realizada la apertura de la albugínea testicular. Con la microdisección, una mínima cantidad de tejido testicular es escindido y puede ser recuperada una cantidad suficiente de espermatozoides. Mediante la obtención de tejido testicular, al realizarse una magnificación óptica pueden identificarse las zonas avasculares del testículo para ocasionar el menor daño posible.

En general, el número de espermatozoides obtenidos por biopsia abierta (TESE) es significativamente mayor que el obtenido por aspiración con aguja.

La biopsia pretratamiento ha dejado de ser desarrollada en muchos centros, para llevarse a cabo en el momento de la recuperación espermática, ya sea previo a un ciclo de FIV con criopreservación o dentro de un ciclo al tiempo de la obtención de ovocitos. Los hallazgos de la biopsia diagnóstica son útiles para evaluar la probabilidad de TESE exitosa, pero no son garantía de que serán encontrados espermatozoides el día de FIV. Se ha reportado que de un 20% a un 35% de los hombres con azoospermia no obstructiva tienen espermatozoides en eyaculados previos a TESE.

El patrón espermático más avanzado (no el predominante) hallado en la biopsia testicular parece estar relacionado con los resultados de recuperación espermática. Así, se tiene  que se pueden encontrar espermatozoides hasta en un 81% de los casos de hipoespermatogénesis; en un 42% de aquéllos con arresto de la maduración y en un 24% de los pacientes con patrón histológico de sólo células de Sertoli.

Schlegel y colaboradores, reportaron recuperación espermática en pacientes con azoospermia no obstructiva: en el 95% de los pacientes con hipoespermatogénesis (documentada por previa biopsia testicular), en el 90% de los que tienen arresto de maduración, en el 30% de los que tienen sólo células de Sertoli, en el 75% de los hombres con azoospermia obstructiva debido a criptorquidia, que se someten a TESE, y en el 70% de los hombres con Síndrome de Klinefelter que se someten a Micro-TESE.

Schlegel encuentra que la microdisección mejora las tasas de recuperación del 45% (10/22) al 63% (17/27) en una serie secuencial de intentos de TESE. La muestra por microdisección produjo 160.000 espermatozoides  en 9,4 g de tejido; mientras que solamente 64.000 espermatozoides fueron encontrados en muestras obtenidas por biopsias convencionales, con un promedio de 720 mg  de tejido escindido.

La TESE no está exenta de complicaciones y así Schlegel y Sue, reportaron daño en el flujo sanguíneo testicular por desvascularización después de múltiples biopsias. Por lo que proponen, entonces, el método microquirúrgico de TESE (Micro-TESE), con el que se obtiene un número abundante de espermatozoides a partir de una mínima cantidad de tejido testicular en hombres con azoospermia no obstructiva.

En este procedimiento, los túbulos seminíferos dilatados entre túbulos seminíferos colapsados son los que probablemente contienen espermatozoides. Aunque con Micro-TESE la recuperación de espermatozoides en azoospermia no obstructiva es menor que con múltiples biopsias, la microdisección produce una mayor concentración de espermatozoides, con menos tejido removido.

Las ventajas de la micro-TESE, además de las tasas de recuperación de espermatozoides superiores, incluyen la prevención de complicaciones como hematomas, fibrosis, y la producción de andrógenos alterada. 

Un método alternativo descrito por Turek y colaboradores es el mapeo del testículo por múltiples aspiraciones con aguja fina, que permite determinar los mejores sitios para, más tarde, desarrollar TESE o TESA; así el paciente confortablemente tiene acceso a FIV o ICSI sin la incertidumbre y sin el uso de tejido testicular criopreservado, lo cual puede afectar a la tasa de embarazo.

Los túbulos seminíferos logrados por TESE o TESA pueden ser sometidos a disección mecánica para la obtención de espermatozoides y colocarlos en el medio de incubación de espermatozoides. En muchos centros de fertilidad, primero se diseca el tejido de los túbulos entre 2 pequeñas agujas (26 ó 27 gauge), y si no se observan espermatozoides se procede a hacer una remoción enzimática del tejido. Si sólo se obtuvieron espermatozoides no móviles, éstos se pueden incubar con pentoxifilina o puede ser necesario hacer un test de shock hipoosmótico para seleccionar los espermatozoides viables que serán inyectados en cada ovocito.


TEFNA

(Urbina. Lerner Biber. Fertilidad y reproducción asistida. Primera edición. Caracas: Editorial Médica Panamericana; 2008). Este otro procedimiento puede utilizarse tanto en la azoospermia obstructiva como en la azoospermia no obstructiva, en el cual se combina tanto la aspiración epididimaria como testicular con aguja fina; para ello, se utiliza una aguja tipo mariposa número 23 conectada a una jeringa de 20 cm3, acoplada a un sistema de succión manual como el anteriormente descrito. La aguja es introducida dentro de la cabeza del epidídimo y se aplica succión. Cuando el fluido epidimario deja de acumularse en el tubo, la aguja es retirada y el aspirado vertido en el medio de incubación de espermatozoides. Se utiliza anestesia local para aliviar las molestias que se ocasionarían en el procedimiento al sujeto.

Esta técnica parece ser eficiente, fácil de aprender, permite al operador la posibilidad de llegar a varios sitios intratesticulares, segura y bien tolerada por todos los pacientes, y podría llegar a considerarse la primera opción siempre que la recuperación de espermatozoides se intente en pacientes con azoospermia no obstructiva, según el estudio de Aby Lewin y colaboradores. Además, aumenta la posibilidad de recuperación de espermatozoides para ICSI, casi sin reducción en el volumen testicular.

Según el estudio de Bhushan y colaboradores, múltiples aspiraciones con aguja fina testiculares se han intentado en los hombres con azoospermia no obstructiva con éxito variable. El éxito de la recuperación de espermatozoides por TEFNA, según este estudio, depende de la etiología y la gravedad de la causa subyacente de la azoospermia. En un estudio prospectivo que compara la eficacia de múltiples biopsias con aguja con la extirpación testicular abierta, los espermatozoides se recuperaron en sólo el 14% de los pacientes con azoospermia no obstructiva de múltiples aspiraciones de aguja, y en el 63% de los pacientes después de la biopsia con escisión abierta. De este estudio se obtiene que el orden de encontrar espermatozoides de mayor a menor probabilidad en azoospermia no obstructiva es: Micro-TESE, TESE, TEFNA, TESA.


CONCLUSIONES

Las ventajas de las técnicas de recuperación espermática percutáneas (PESA, TESA, TEFNA) es que pueden ser desarrolladas con anestesia local, lo que minimiza morbilidad, y al mismo tiempo, costes. La ventaja de MESA es que la cantidad de espermatozoides que puede ser obtenida es mayor, esto permite la criopreservación de alícuotas extras para posibles futuros ciclos de ICSI.

La TESA puede ser utilizada para obtener espermatozoides testiculares en hombres con azoospermia obstructiva; mientras que la TESE puede ser necesaria para obtener espermatozoides testiculares en hombres con azoospermia no obstructiva, debido a que éstos tienen pocos espermatozoides.

Las posibilidades de recuperación de espermatozoides, y de lograr un nacimiento vivo por ICSI, se incrementan en parejas cuyo sujeto masculino presenta azoospermia obstructiva, en lugar de azoospermia no obstructiva.

Para la obtención de espermatozoides testiculares en hombres con azooospermia no obstructiva, se requiere que el personal del laboratorio de fertilidad sea adecuado y dedicado, ya que el tejido testicular tiene méritos para ser examinado en mayor proyección del tiempo, incluso horas y días después de su extracción en una incubación adecuada, en busca de espermatozoides.

El cirujano debe informar a las parejas de las ventajas y desventajas de cada una de las técnicas de recuperación espermática, así como de la posibilidad de criopreservación en un ciclo previo o en el día de la obtención de los ovocitos. Por último, debe tener la disponibilidad de un lugar de recuperación espermática en un laboratorio apropiado: con materiales, equipos y biólogos, u otro personal cualificado, altamente capacitados, además de estar familiarizado con las preferencias de éstos con respecto al uso de espermatozoides epididimarios o  testiculares, criopreservados o frescos.


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Autora:

         María Jesús Nieto García.


Análisis Funcional del Espermatozoide.

Máster Universitario en Biología y Tecnología de la Reproducción 2015-2016, Universidad de Oviedo.